Niedrige Geschwindigkeitszentrifuge

A Zentrifuge mit niedriger GeschwindigkeitDrehungen zur Erzeugung von Zentrifugalkraft, die Komponenten verschiedener Dichten in einer Probe trennt. Während der Zelltrennung werden Zellen, Zellfragmente und andere Biomoleküle je nach Masse und Dichte durch Zentrifugalkraft in verschiedene Stellen unterteilt. Insbesondere, wenn das Probenröhrchen mit hoher Geschwindigkeit innerhalb des Zentrifugenrotors gedreht wird, ist die Zentrifugalkraft auf die verschiedenen Komponenten des Gemisches proportional zu ihrer Masse und wird auch von der Geschwindigkeit und dem Radius der Drehung beeinflusst. Größere Zellen oder Partikel werden auf den Boden des Zentrifugenröhrchens geworfen, während kleinere Komponenten in der oberen Schicht verbleiben. Dieses auf Dichte und Masse basierende Trennungsprinzip macht Zentrifugen mit niedriger Geschwindigkeit zu einem idealen Werkzeug für die Zelltrennung.

● Auswählen der richtigen Zentrifugalgeschwindigkeit und -zeit: Die Wahl von Geschwindigkeit und Zeit ist entscheidend für die Wirksamkeit der Zelltrennung. Eine zu hohe Rotationsgeschwindigkeit kann zu Zellbruch oder -schäden führen, während zu lang zu einer Zeit zu einer Zellaggregation oder einer unvollständigen Niederschlagung führen kann. Daher sollte die Auswahl der Zentrifugalparameter gemäß Art, Größe und Dichte der Zellen berücksichtigt werden.
● Gewährleistung der Probenbilanz: Die Probenbilanz ist der Schlüssel, um zu verhindern, dass die Zentrifuge während des Betriebs Vibrationen und Rauschen erzeugt. Beim Platzieren von Proben ist es notwendig, sicherzustellen, dass die Proben in allen Zentrifugenröhrchen gleich oder eine ähnliche Masse sind. Bei einem großen Unterschied in der Probenqualität kann eine angemessene Menge an Puffer oder normaler Kochsalzlösung in das hellere Zentrifugenröhrchen hinzugefügt werden, um ein Gleichgewicht zu erreichen.
● Wählen Sie die rechte Zentrifugenröhre aus: Die Qualität und Enge des Zentrifugenröhrchens wirkt sich ebenfalls wichtig auf die Wirksamkeit der Zelltrennung aus. Hochwertige Zentrifugalrohre haben eine gute Versiegelungs- und Korrosionsbeständigkeit, die die Proben-Leckage und -verschmutzung wirksam verhindern können. Gleichzeitig muss auch die Spezifikation des Zentrifugalsrohrs gemäß dem Volumen der Probe und der erforderlichen Zentrifugalkraft ausgewählt werden.
● Achten Sie auf die Wartung und Wartung der Zentrifuge: Reinigen Sie die Zentrifugalkammer und den Rotor der Zentrifuge regelmäßig, um eine Probenreste zu verhindern. Nach dem Gebrauch rechtzeitig wischen, um Korrosion durch flüssige Rückstände zu vermeiden. Gleichzeitig ist es auch erforderlich, regelmäßig das Netzkabel und die Stecker und andere Komponenten der Zentrifuge zu überprüfen, um sicherzustellen, dass sie intakt sind und Sicherheitsrisiken vermeiden.

● Zellbehandlung in der Gentechnik: In Gentechnik müssen Zellen häufig kultiviert, transfiziert, gescreent und andere Behandlungen kultiviert werden. Zentrifugen mit niedrigen Geschwindigkeiten können für Schritte wie Konzentration und Waschen von Zellsuspensionen sowie für die Sammlung von Zellen nach der Transfektion verwendet werden. Durch Zentrifugation können Verunreinigungen und nicht transfizierte Zellen im Zellkulturmedium entfernt werden, und die Effizienz und Reinheit der Gentransfektion kann verbessert werden.
● Proteinreinigung und Isolation: In der Proteinforschung müssen spezifische Proteine ​​aus komplexen biologischen Proben gereinigt werden. Zentrifugen mit niedrigen Geschwindigkeiten können zur anfänglichen Klärung von Proteinlösungen und zur Entfernung von Verunreinigungen wie Zelltrümmern, Nukleinsäuren usw. verwendet werden. Durch Zentrifugalbehandlung kann eine relativ reine Proteinlösung erhalten werden, die die Grundlage für nachfolgende Reinigungsschritte liefert.
● Isolierung und Reinigung von Viruspartikeln: Viruspartikel haben normalerweise eine spezifische Dichte und Größe und können durch niedrige Geschwindigkeitszentrifugen getrennt und gereinigt werden. In der virologischen Forschung können virale Partikel beispielsweise unter Verwendung differentieller Zentrifugation von Zellkulturen getrennt werden. Diese Methode nutzt Unterschiede in den Zentrifugalkräften bei unterschiedlichen Geschwindigkeiten, um virale Partikel von anderen zellulären Komponenten zu trennen.
● Produktions- und Qualitätskontrolle von biologischen Arzneimitteln: Im Produktionsprozess von biologischen Arzneimitteln werden häufig niedrige Zentrifugen zur Klärung der Zellkulturflüssigkeit, zur Entfernung von Zelltrümmern und zur anfänglichen Trennung von Arzneimitteln verwendet. Darüber hinaus können bei der Qualitätskontrolle von Arzneimitteln niedrige Zentrifugen mit niedrigen Geschwindigkeiten verwendet werden, um wichtige Indikatoren wie die Größenverteilung und die Stabilität von Arzneimittelpartikeln zu erkennen.

◇ Primärtrennung: Zentrifugen mit niedriger Geschwindigkeit werden häufig zur primären Trennung von Viruspartikeln verwendet. Im Prozess der Virus-Extraktion können große Partikel wie Zellfragmente und Verunreinigungen durch Zentrifugation mit niedriger Geschwindigkeit entfernt und eine relativ reine Virus-Suspension erhalten werden. Dieser Schritt erleichtert die nachfolgenden Reinigungsschritte.
◇ Virusanreicherung: In einigen Fällen können auch Zentrifugen mit niedrigen Geschwindigkeiten für die Virusanreicherung verwendet werden. Durch Einstellen der Zentrifugenzeit und -geschwindigkeit können die Viruspartikel am Boden des Zentrifugenröhrchens abgelagert werden, so dass die konzentrierte Virusprobe durch Extrahieren des Überstands erhalten werden kann. Es ist jedoch zu beachten, dass der Anreicherungseffekt von Zentrifugen mit niedriger Geschwindigkeit relativ begrenzt ist, und für Anlässe, in denen hochpurige Viren erforderlich sind, sind in der Regel andere Reinigungsmethoden erforderlich.

 

● Differentialzentrifugalmethode: Differentielle Zentrifugalmethode ist eine Methode zur Trennung von Partikeln unterschiedlicher Größen und Dichten unter Verwendung unterschiedlicher Geschwindigkeiten und Zentrifugalzeiten. Differentielle Zentrifugation wird häufig verwendet, um Verunreinigungen weiter zu entfernen und das Virus während der Virusreinigung zu konzentrieren. Nach dem Entfernen großer Partikel wie Organellen durch Zentrifugation mit niedriger Geschwindigkeit werden die Viruspartikel durch Hochgeschwindigkeitszentrifugation ausgefällt.
● Zentrifugationsmethode der Dichtegradienten: Die Dichtegradient -Zentrifugationsmethode ist die Verwendung von Medien unterschiedlicher Dichten, um einen Gradienten zu bilden, so dass sich Partikel unterschiedlicher Dichten in der Gradientenmethode zu verschiedenen Positionen niederlassen. Bei der Virusreinigung wird häufig die Zentrifugation von Dichtegradienten verwendet, um Viruspartikel von anderen Verunreinigungen ähnlicher Dichte zu trennen (wie Proteine, Nukleinsäuren usw.). Durch die Herstellung des Dichtegradienten im Zentrifugenröhrchen im Voraus und das Hinzufügen der Virus -Suspension auf der Oberfläche des Gradienten für die Zentrifugation werden die Viruspartikel in einer bestimmten Position im Gradienten zur Bildung einer Sedimentationszone abgelehnt.
● Niederschlagsmethode: Die Niederschlagsmethode besteht darin, die Viruspartikel durch Zugabe chemischer Reagenzien auszurüsten. Zu den häufigen Ausfällen gehören Ammoniumsulfat, Polyethylenglykol (PEG) usw. Die Niederschlagsmethode kann zur weiteren Reinigung des Virus verwendet werden. Durch die Einstellung der Konzentration und des pH -Werts des Abhüllers können die Viruspartikel selektiv ausgefällt werden, um die Verunreinigungen zu entfernen.
● Filtrationsmethode: Die Filtrationsmethode ist eine Methode zur Trennung von Viruspartikeln von anderen Verunreinigungen durch Gelfiltrationschromatographiespalte. Die Chromatographie der Gelfilterchromatographie wird gemäß der Partikelgröße getrennt, und die großen Moleküle fließen zuerst aus der chromatographischen Säule, und die kleinen Moleküle fließen später aus. Durch die Auswahl geeigneter Gel- und chromatographischer Erkrankungen können Viruspartikel effektiv von anderen Verunreinigungen getrennt werden.
● Elektrophoretische Methode: Elektrophoretische Methode ist die Verwendung von elektrischer Feldwirkung, um geladene Partikel im elektrischen Feldwanderungsmethode herzustellen. Bei der Virusreinigung wird häufig die Elektrophorese verwendet, um Viruspartikel von anderen geladenen Verunreinigungen zu trennen. Die effiziente Trennung und Reinigung von Viruspartikeln kann durch Auswahl geeigneter Elektrophorese -Bedingungen und -medien erreicht werden.

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